RNAprepピュアティッシュキット
特徴
■動物組織用に最適化されたバッファーにより、プロセスがシンプルで便利になります。
■独自のDNaseIは、ゲノムDNAのコンタミネーションを最小限に抑えます。
■高純度ですぐに使用できるRNAは、敏感なダウンストリームアプリケーションに適しています。
■フェノール/クロロホルム抽出、LiClおよびエタノール沈殿、CsClグラジエント遠心分離が不要なため、プロセスの安全性と信頼性が向上します。
アプリケーション
■RT-PCR。
■ノーザンブロット、ドットブロット。
■リアルタイムPCR。
■チップ分析。
■PolyAスクリーニング、in vitro翻訳、RNase保護分析、分子クローニング。
すべての製品はODM / OEM用にカスタマイズできます。詳細については、カスタマイズされたサービス（ODM / OEM）をクリックしてください
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材料：20mgの胚（13日）、15mgの腎臓、10mgの肝臓、15mgの脾臓、10mgの胸腺、20mgの肺 方法：ラットのさまざまな組織サンプルからのトータルRNAを、RNAprep Pure TissueKitを使用して精製しました。 結果：アガロースゲル電気泳動の写真を上に示します。レーンごとに2〜4μlの100μl溶出液をロードしました。 M：TIANGENDNAマーカーIII; レーン1-2：胚（13日）; レーン3：腎臓; レーン4-6：肝臓; レーン7：脾臓; レーン8：胸腺; レーン9：肺。 電気泳動は、1％アガロースゲル上で6V / cmで30分間行った。 |
A-1細胞溶解または均質化が不十分
----サンプルの使用量を減らし、溶解バッファーの量を増やし、均質化と溶解時間を増やします。
A-2サンプル量が多すぎます
----使用するサンプルの量を減らすか、溶解バッファーの量を増やします。
A-1不十分な細胞溶解または均質化
----サンプルの使用量を減らし、溶解バッファーの量を増やし、均質化と溶解時間を増やします。
A-2サンプル量が多すぎます
----最大処理能力を参照してください。
A-3RNAがカラムから完全に溶出されていない
---- RNaseフリーの水を加えた後、遠心分離する前に数分間そのままにしておきます。
A-4溶離液中のエタノール
----すすいだ後、再度遠心分離し、洗浄バッファーを可能な限り除去します。
A-5細胞培養液が完全に除去されていない
----細胞を採取する際は、培地をできるだけ取り除いてください。
A-6RNAstoreに保存されている細胞は効果的に遠心分離されていません
---- RNAstore密度は平均的な細胞培養培地よりも大きいです。したがって、遠心力を増やす必要があります。3000xgで遠心分離することをお勧めします。
A-7サンプル中の低RNA含有量と存在量
----陽性サンプルを使用して、低収量がサンプルによって引き起こされているかどうかを判断します。
A-1素材が新鮮ではない
----抽出効果を確実にするために、新鮮な組織は液体窒素にすぐに保存するか、すぐにRNAstore試薬に入れる必要があります。
A-2サンプル量が多すぎます
----サンプル量を減らします。
A-3RNase汚染n
----キットに含まれているバッファーにはRNaseが含まれていませんが、抽出プロセス中にRNaseを汚染しやすいため、取り扱いには注意が必要です。
A-4電気泳動汚染
----電気泳動バッファーを交換し、消耗品とローディングバッファーにRNaseコンタミネーションがないことを確認します。
A-5電気泳動の負荷が大きすぎる
----サンプルのローディング量を減らします。各ウェルのローディングは2μgを超えてはなりません。
A-1サンプル量が多すぎます
----サンプル量を減らします。
A-2一部のサンプルはDNA含有量が高く、DNaseで処理できます。
----得られたRNA溶液に対してRNaseフリーDNase処理を行うと、RNAは処理後の後続の実験に直接使用することも、RNA精製キットでさらに精製することもできます。
ガラス製品の場合、150°Cで4時間焼きます。プラスチック容器の場合は、0.5 M NaOHに10分間浸し、RNaseを含まない水で十分にすすぎ、滅菌してRNaseを完全に除去します。実験で使用する試薬または溶液、特に水には、RNaseが含まれていてはなりません。すべての試薬調製にRNaseフリー水を使用します（きれいなガラス瓶に水を加え、DEPCを最終濃度0.1％（V / V）になるように加え、一晩振とうしてオートクレーブします）。
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